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CHO/dhFr-中國倉鼠卵巢細(xì)胞－二氫葉酸還原酶缺陷型
貨號：BY-1294
品牌：其它品牌
規(guī)格：T25瓶
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CHO/dhFr - 中國倉鼠卵巢細(xì)胞－二氫葉酸還原酶缺陷型簡介
CHO/dhFr - 細(xì)胞是中國倉鼠卵巢細(xì)胞（CHO）的特殊突變株，因缺乏二氫葉酸還原酶（DHFR）活性而得名。DHFR 是葉酸代謝途徑中的關(guān)鍵酶，參與四氫葉酸的合成，而該細(xì)胞系由于 DHFR 基因缺陷，無法在不含次黃嘌呤和胸腺嘧啶的培養(yǎng)基中存活，這一特性使其成為基因工程和生物制藥領(lǐng)域的重要工具。
從生物學(xué)特性來看，CHO/dhFr - 細(xì)胞保留了 CHO 細(xì)胞的基本形態(tài)與生長特征，呈上皮樣貼壁生長，細(xì)胞形態(tài)多為多邊形或不規(guī)則形。在適宜條件下，細(xì)胞增殖能力較強(qiáng)，倍增時間約為 18 - 24 小時，可穩(wěn)定傳代，適合大規(guī)模培養(yǎng)。與野生型 CHO 細(xì)胞相比，其*顯著的差異在于 DHFR 缺陷，這一特性使得該細(xì)胞在篩選和擴(kuò)增外源基因時具有獨(dú)特優(yōu)勢。
在培養(yǎng)和基因工程操作方面，CHO/dhFr - 細(xì)胞需要在添加了次黃嘌呤和胸腺嘧啶（HT）的培養(yǎng)基中才能正常生長。當(dāng)利用該細(xì)胞進(jìn)行基因表達(dá)研究時，通常將編碼 DHFR 的基因與目的基因共同構(gòu)建到表達(dá)載體中，轉(zhuǎn)入細(xì)胞后，將細(xì)胞置于不含 HT 但含有甲氨蝶呤（MTX）的培養(yǎng)基中篩選。MTX 是 DHFR 的強(qiáng)抑制劑，普通細(xì)胞會因 MTX 抑制 DHFR 活性而死亡，而成功轉(zhuǎn)入 DHFR 基因和目的基因的細(xì)胞則能夠在這種培養(yǎng)基中存活并大量增殖，從而實(shí)現(xiàn)對目的基因陽性克隆的高效篩選。同時，逐步提高 MTX 濃度，可促使細(xì)胞內(nèi)整合的表達(dá)載體拷貝數(shù)增加，進(jìn)而顯著提高目的蛋白的表達(dá)水平。
在應(yīng)用領(lǐng)域，CHO/dhFr - 細(xì)胞發(fā)揮著重要作用。在生物制藥行業(yè)，它是生產(chǎn)重組蛋白藥物的理想宿主細(xì)胞。全球眾多上市的治療性單克隆抗體、細(xì)胞因子、生長激素等生物藥均采用該細(xì)胞系生產(chǎn)，如治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的阿達(dá)木單抗等。由于其能夠?qū)Ρ磉_(dá)的蛋白進(jìn)行正確的折疊、糖基化等翻譯后修飾，生產(chǎn)出的重組蛋白藥物具有與天然蛋白相似的結(jié)構(gòu)和功能，且**性高、免疫原性低。此外，在基礎(chǔ)科研中，CHO/dhFr - 細(xì)胞也常用于研究基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制、蛋白質(zhì)功能及細(xì)胞信號通路等，為生命科學(xué)領(lǐng)域的探索提供了重要的細(xì)胞模型。